Dos criterios deben diagnosticar AHA: evidencia serológica de autoanticuerpos y evidencia clínica o de laboratorio de hemólisis. La evidencia serológica de autoanticuerpos es proporcionada por una prueba positiva de autocontrol y antiglobulina directa (DAT, prueba de Coombs directa) y la subsiguiente identificación de los autoanticuerpos en una disolución de glóbulos rojos y, posiblemente, de suero. La reactividad del suero con glóbulos rojos autólogos generalmente indica la presencia de autoanticuerpos, pero no excluye la presencia de los mismos.
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